香连丸－盐酸小檗碱的测定－薄层扫描法

本方法采用薄层扫描法测定香连丸中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于中成药香连丸的测定。

供试品于索氏提取器中经盐酸-甲醇加热回流，过滤，滤液蒸干，并用盐酸-甲醇稀释，制成供试液。点样、展开，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λ_S=350nm，λ_R=365nm测量盐酸小檗碱吸收度积分值，计算其含量。

1. 盐酸

2 .甲醇

3 .苯

4.醋酸乙酯

5.异丙醇

6.氨水

1 仪器

1.1 索氏提取器

1.2 薄层扫描仪

1.3分析天平

1.4点样器

定量毛细管

1.5展开室

可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。

2材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

2.2吸附剂

硅胶G其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。

1.对照品溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

2.供试品溶液的制备

精密称取供试品粉末（过三号筛-50目)约0.4g，置索氏提取器中，加盐酸-甲醇（1：100)适量，提取至无色，提取液至水浴上蒸至约20mL，定量转移至50 mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.薄层板制备

将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25～0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。

2.点样

2.1对照品点样

精密吸取对照品溶液0.5，1，2，3，4，5µL分别点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

2.2供试品点样

精密吸取供试品溶液2μL、对照品溶液1µL与3µL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3.展开

将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-水（6:3:1.5:15:0.3)为展开剂，另槽中加入等体积的浓氨水，预平衡30min后，上行展开至8cm时，取出薄层板，晾干

4.含量测定

4.1标准曲线绘制

在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，用双波长进行扫描，波长：λ_S =350nm，λ_R=365nm，测量对照品吸收度积分值，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。

4.2供试品测定

在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，用双波长进行扫描，波长：λ_S =350nm，λ_R=365nm，测量供试品吸收度积分值，计算含量。

周华平，宋广聪. 薄层扫描法测定香连丸中盐酸小檗碱的含量. 基层中药杂志，2000，14（5)：15-16